Domanda
A quanto devono essere concentrate le cellule per la procedura di sorting?
Risposta
- Se si hanno troppo poche cellule, il sorting sarà più lungo e la vitalità potrà risentirne.
- Se le cellule sono troppo concentrate, si rischia una diminuzione della purezza e ostruzione dello strumento.
👉 Una preparazione cellulare ottimale migliora la vitalità e porta a una resa più alta.
Linee guida:
- Se si hanno meno di 10×10⁶ cellule, preparare le cellule in un volume di 0,5 mL.
- La concentrazione raccomandata per BD FACSAria III è di 20-30 milioni/mL, a seconda del tipo cellulare.
- Se troppo concentrate, possiamo diluirle in facility
- Se non si è certi, è meglio portarle più concentrate (possono sempre essere diluite).
- Contare le cellule subito prima del sorting (dopo tutti i lavaggi).