Domanda

Quali controlli devo portare con me?

Risposta

Si raccomanda di portare i seguenti controlli per esperimenti di citometria a flusso:

1. Cellule non colorate come controllo negativo.
2. Cellule non stimolate/non trattate come controllo biologico.
3. Cellule o beads marcati singolarmente per la compensazione.
4. Controllo isotipo o FMO (fluorescence minus one).
5. Se si utilizza un colorante per escludere cellule morte, è necessario portare un controllo di vitalità separato per un corretto gating, poiché le cellule morte non sempre possono essere escluse in base alla dispersione della luce. Si consiglia di uccidere una parte delle cellule, mescolarle con cellule vive e poi colorarle con il proprio colorante di vitalità (es. PI, 7-AAD, DAPI, TO-PRO-3).
6. Un controllo non trasfettato in caso di sorting di proteine fluorescenti.